多倍体萱草——金娃娃的组织培养繁殖方法
于晶波
(长春市园林科学研究所 130062)
萱草系百合科多年生草本花卉。金娃娃是从萱草杂交选育出来的多倍体萱草品种。其株型矮生、叶片深绿色、黄色花，花期长达6个月。适应性、抗逆性、观赏性均佳。
一、生物学特性
1、形态特征
丛生植株，高约30cm，具有短根状茎和肉质肥大纺锤状块根。叶基生，线状披针形，长30-40cm，宽0.5-1.0cm。花葶高出株高1-5cm，圆锥状花序，每个花葶着花7-10朵，纯黄色花，漏斗形，花期5-10月，单花期5-7天，果熟期7-10月。
2、生态习性
喜阳、耐干旱瘠薄，在湿润及半阴条件下生长更佳。对土壤的适应性较强，在腐殖质含量高，排水良好的沙壤土生长旺盛，耐寒，抗病虫性强。
3、繁殖方法
金娃娃系萱草多倍体的品种，结实率极低，且播种繁殖后代变异范围很大。目前，生产上只能是多分株繁殖，每年春季或秋季分株一次。繁殖系数低，繁殖速度慢。利用组织培养的方法，可以解决快速大量繁殖的问题。同时，可提高金娃娃的商品价值，满足观赏栽培的要求。
二、试验材料及方法
1、取材及消毒
2001年7月中旬，从我所试验地栽植的金娃娃植株上选择生长发育良好的花蕾作为外植体，采集植株上的花蕾，先用牙刷轻轻洗刷一遍，然后用自来水冲洗几遍，再用洗衣粉水浸泡2分钟，最后用自来水冲洗数次后，移置于超净工作台上。用0.1%氯化汞溶液浸泡杀菌7分钟，然后用无菌水冲洗5-6次，再用无菌滤纸吸去材料表面的水分，待接种。
2、培养基的选择与培养条件
以Ms为基本培养基，且于培养基中分别加有不同浓度的BA0.6-1.0mg/L和NAA0.1-0.7mg/L及KT0.5-1.0mg/L。其中蔗糖含量为3%，琼脂6.5%，PH值调至5.6-5.8，培养室温度在25±2℃，光照强度约1000-1500LX，光照时间为10小时。
3、实验方法
将预处理后的金娃娃花蕾材料切下接种于诱导、分化、继代培养基上，调整培养基中附加激素的比例，可获得大量丛生芽，将丛生芽中高大植株切下，接于生根培养基上，被诱导生根后的植株于15天后即可移栽，移栽于花槽后，置于阴棚中保湿10余天，即可成为健壮、完整的小植株。
4、诱导生根培养基
当丛生的试管幼苗长到2-3cm时，即可转入不同生长素浓度配比的1/2MS+NAA0.1—0.4mg/L生根培养基中，经实验培养生根效果较好，植株生根率高达95%以上。
三、实验结果分析
1、芽诱导与分化
将灭菌过的花蕾外植体纵切成大致相等的块段，接种到芽诱导培养基MS+BA0.5—1.0mg/L+NAA0.05-0.01mg/L+KT0.5-1.0mg/L不同浓度的分化培养基中，进行不同浓度的配比实验(结果见附表)。
通过对比实验，结果表明，外植体在MS+BA0.5+NAA0.05+KT0.5mg/L培养基中诱导分化效果较差。但在MS+BA1.0+NAA0.1+KT1.0mg/L培养基中培养，诱导分化效果最佳。而在MS+BA0.75+NAA0.075+KT0.75mg/L培养基中，芽苗节间伸长受到阻制，分化效果未达到最佳程度。
附表：不同配比激素对金娃娃芽苗分化的影响
培养基激素比例(mg/L) 接种外植体数 增殖芽数 芽苗生长情况
BA0.5+NAA0.5+KT0.5 20 29 极少丛生芽
BA1.0+NAA0.1+KT1.0 20 62 大量丛生芽
BA0.75+NAA0.075+KT0.75 20 37 丛生芽多，但植株矮
2、芽的增殖和生长
将在诱导培养基上形成的愈伤组织转移到MS+BA0.6—0.8mg/L+NAA0.3-0.7mg/L的培养基上进行继代培养，经过6-8周培养生长，可以形成丛生芽，而且逐次递增，待基长出3枚叶片时，切下转移到生根培养基上。
3、根的诱导
将在增殖培养基上生长的无根小苗移接在生根培养基上，一周左右时间有根尖分化，10天左右有较多的根毛出现，生根率可达95%以上。实验表明，幼苗在1/2MS+NAA0.3mg/L，生根培养基上的生长效果最好，生根率可达95%。
4、移植方法
将已生根的植株打开瓶盖炼苗2-3天，然的取出，洗净根部的琼脂，移栽到用高锰酸钾消毒处理过的河沙基质中，并放置在遮阴的塑料薄膜弓棚内，移栽2天后喷施多菌灵一次。10天左右植株会产生新的根系，撤去塑料膜和遮阴网，经过15天左右，炼苗后即可上盆。盆土可选用：园田土：草碳土：马粪土＝3:2:1，或者用：园田土：河沙：马粪＝3:2:1等均可。四、结论
1、经过一年多的组织培养研究，发现金娃娃继代培养的时间较为关键，必须及时处理，才能获得较好的分化苗，并且试管苗生长发育健壮，根茎粗壮，花繁叶茂。2、诱导转移生根的时间要掌握好，否则影响根系诱导和植株的发育生长。
3、试管苗移栽基质，经过对比实验认定粗河沙最好。经济适用，生产成本费用较低。
4、试管苗移栽成活后，加强栽培管理，特别注意浇水施肥，促进植株的旺盛生长。移栽上盆时，要选择渗透性较好的沙壤土，创造良好的生长条件。
主要参考文献：
1、曹孜义、刘国民编著《实用植物组织培养技术教程》。
2、韦三立著《花卉组织培养》。