垂吊矮牵牛的组织培养与快速繁殖


徐慧   周莉

(武汉市园林科研所430O81


   摘要
:垂吊矮牵牛是近年来引进的杂交一代优良花卉品种。它不仅花色艳丽,而且花期很长,在武汉地区从4月至11月,花期共有7个多月。垂吊矮牵牛枝条柔软,宜于在各类栽植器中做多种造型,既可用于美化街道及各种建筑物,又适于家庭悬挂,装扮居室。为了在短期内获得大量种苗,我们采取了组培的方式,培养出一万多株垂吊矮牵牛试管苗,经过几个月的栽培,已于4月份开花,并已用于武汉市街道的绿化美化。

    关键词:组织培养  垂吊矮牵牛  快速繁殖

    一、植物名称:垂吊矮牵牛

    二、材料类别:紫红色垂吊矮牵牛的叶片及带顶芽的茎段。

    三、培养条件:以MS为基本培并基,诱导

及增殖培养基分别为以下几种。

1 MS 6 BA 05mg L1(单位不同)+NAA 0 1

2 MS6- BA1 NAA01

3 MS 6-BA15NAA 01

4 MS 6-BAZ NAA 01

5 MS6 -BA3NAA  0l

6 MS6-BAI+NAAO2

7)壮苗培养基:MS

8)生根培养基:MS IBAO 5

9MS IBAO 5 AClg. L-  1

    上述培养基均为固体培养基,25%蔗糖,085%琼脂, PH58,培养温度(25 ± 2)℃,光照 1214hd1 ,光照度 14001600LX

      四、生长与分化情况

    1.愈伤组织及芽的诱导

    取垂吊矮牵牛的幼嫩叶片及带顶芽的茎段,用自来水冲洗干净,在超净工作台上用75%酒精浸泡30 S,再用10%次氯酸钠溶液浸泡9 min,用无菌水冲洗 3次,用消毒滤纸吸干表面水分,将幼嫩叶片切成0505 cm左右大小,与带顶芽的茎段一起分别接种于培养基(1)一(6)中培养。15天后开始观察,(l)、(2)号培养基中嫩叶 90%以上已长出愈伤组织,愈伤组织为绿色,质地紧密,且膨大成为大块的愈伤团,其中50%的愈伤组织开始分化出芽;带顶芽的茎段侧芽开始增长,基部膨大,形成愈伤组织。(3)、(4)、( 6)号培养基  90%以上嫩叶长p愈伤组织,愈伤组织为绿色,质地紧密,但只限于叶片四周的切口处,且尚无芽的分化;带顶芽的茎段侧芽有所增长。(5)号培养基嫩叶切口处仅有少量愈伤组织,无芽的分化,带顶芽的茎段侧芽伸长不明显。30天后,(l)、(2)号培养基中的愈伤组织芽的分化率达  10o%,带顶芽的茎段除侧芽外,基部形成的愈伤组织亦分化出大量的丛生芽,每块 1cm X1cm的愈伤组织能分化出芽3040个,且(1)号培养基多于(2)号培养基,与(1)、(2)号培养基相比,(3)、(4)、(5)、(6)号培养基虽然叶片形成的愈伤组织也能分化出芽,但每块愈伤组织分化出的芽大大少于前者,特别是(5)号培养基,每块愈伤组织仅分化出13个芽。由此可见,低浓度的6——BA对垂吊矮牵牛的分化更有利,所以,我们在以后的快速繁殖中多采用(1)号培养基。

    2.快速繁殖

    将已分化出芽的愈伤组织分割切小,转接入(1)号培养基中,可以获得大量的丛生芽,每隔1520天进行一次,可以不断地获得大量的试管苗。

    3.生根与移栽

    将带有大量丛生芽的愈伤组织转入不含激素的MS培养基(7)中,丛生芽不再增殖,而是起到壮苗的作用,以利生根。10天后,当试管苗长到2 cm左右时,切下转入生根培养基(8)。(9)中,710天后,(8)号培养基中的试管苗可长出 12 cm长的多条不定根,根短而粗壮;(9)号培养基中的试管苗长出多条细而长的不定根。将生根的苗打开封口膜在室内炼苗l2天,小心取出苗,洗净培养基,栽入用多菌灵处理过的泥炭土十珍珠岩(11)基质中,当阳光强时可适当遮阴,温度保持在2532℃,空气相对湿度 60%一 75%, 1 2天浇水1次,15天后,(8)号培养基中出苗成活率达99%,而(9)号培养基中出苗成活率仅为70%。所以生根培养基选择(8)号较好。

    五、发现与问题

    通过利用F.代种子萌发获得的植株与试管苗对照来看,试管苗长得更丰满,叶片更饱满,茎更粗壮,花也更多。   

经过半年多的组培,我们还发现了一些问题,垂吊矮牵牛继代次数过多,愈伤组织由绿色转成黄绿色,且分化出的试管苗也变黄,茎变细,联体植株也由原来的千分之二上升到百分之二。所以,我们只能用叶片重新进行诱导,以确保试管苗的品质。